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[Lumiprobe 한국공식대리점] Assaying Cell Proliferation and DNA Replication with Click Chemistry

작성자
관리자
작성일
2025-10-29
조회수
114



어스바이오는 Lumiprobe 한국 공식 대리점입니다.

어스바이오는 Lumiprobe 한국 공식 대리점으로서 모든 제품을 전문적으로 취급 및 공급하고 있습니다.

 

[Lumiprobe 한국공식대리점] Assaying Cell Proliferation and DNA Replication with Click Chemistry




Assaying Cell Proliferation and DNA Replication with Click Chemistry

세포 증식 분석(Cell proliferation assay)은 세포독성 연구, 암 연구, 그리고 세포생물학의 여러 분야에서 널리 사용됩니다. 이러한 분석법 중 다수는 형광 표지를 통해 증식 중인 세포를 시각화할 수 있으며, 고속 대량 스크리닝(high-throughput screening)에도 적합합니다. 복제된 DNA를 검출하는 것은 세포 증식을 감지하는 가장 직접적인 방법으로 여겨집니다. 이는 복제 과정 중 DNA에 삽입되는 브로모데옥시유리딘(bromodeoxyuridine, BrdU) 뉴클레오사이드를 이용해 수행됩니다. 이후, 세포 내 DNA에 포함된 이 뉴클레오사이드 변형은 항-BrdU 항체를 사용하여 검출할 수 있습니다. 그러나 이 분석법은 특이성이 높음에도 불구하고, 항체가 세포 구조를 통과하지 못하기 때문에 DNA를 노출시키기 위해 강한 시약으로 세포를 처리해야 하므로 번거롭고 재현성이 떨어집니다.

보다 온화한 대안으로는 에티닐 데옥시유리딘(ethynyl deoxyuridine, EdU)이 있습니다. EdU는 세포 배양액에 첨가하거나 동물에 주사하여 세포에 도입할 수 있습니다. DNA에 EdU가 삽입된 후, 이는 구리(I) 촉매 반응 하에서 다양한 형광 염료 아자이드(fluorescent dye azide)와 결합되어 복제된 DNA를 형광으로 염색할 수 있습니다. 이 분석법은 수행이 간단하고 빠르며 재현성이 높습니다. 또한 세포를 심하게 처리할 필요가 없고(트리톤을 이용한 투과화 처리만 필요), 세포 구조를 더 잘 보존합니다. 염료 아자이드 처리와 최종 세척 단계(step 8) 이후에는 Hoechst, DAPI 또는 형광 표지된 항체와 같은 다양한 파장의 형광체를 사용하여 세포를 표지할 수 있습니다.

 

Required reagents
- 5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU)
- Copper(II)-BTTAA complex — сlick сhemistry catalyst
- Ascorbic acid — reductant for copper
- Fluorescent dye azides
- DMSO, labeling grade — solvent for azides
- Triton X-100 (or Tween-20)
- PBS, pH 7.4
- 100 mM Tris buffer, pH 7.4

Related products
- BrdU (5-Bromo-2′-deoxyuridine)
- Copper(II)-BTTAA complex
- EdU (5-Ethynyl-2'-deoxyuridine)

 

 


 

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